3M Petrifilm (STX) (Кат.№6491, Кат.№6493) - Петрифильмы для подсчета Staph.aureus

Электронная почта
Нет заданного изображения
Нет заданного изображения
Описание
  • Описание
    Экспресс-тесты  Staph Express Count Plate предназначены для подсчета стафилококков в образцах пищевых продуктов, продовольственном сырье, смывах с объектов внешней среды.. Тесты содержат готовую питательную среду и гелеобразующее вещество. Используется модифицированная хромогенная среда на основе среды Байрд-Паркера для выявления Staphylococcusaureus. Красно-фиолетовые колонии на среде являются S.aureus. Если на петрифильме образуются колонии других цветов (например, черные или сине-зеленые колонии), то проводят идентификацию с использованием  диска Petrifilm Staph Express Disk. Данный диск содержит краситель (толуидин синий) и ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту). S.aureusпродуцирует фермент ДНК-азу, который реагирует с красителем и образует зоны розового цвета. При реакции с диском так называемые, коагулазоположительные стафилококки - S.aureus (иногда S.hyicus, и S.intermedius). Большинство других бактерий не образуют розовые зоны.

Хранение и утилизация
Хранить невскрытые упаковки с петрифильмами следует в холодильнике при температуре 2-8°C. Неиспользованные петрифильмы поместите обратно в упаковку. Чтобы предотвратить контакт с влагой, не храните открытые упаковки в холодильнике. Храните вновь запечатанные упаковки в сухом прохладном месте в течение не более одного месяца. Нахождение вскрытых упаковок петрифильмов при температуре более 25°C и/или относительной влажности свыше 50% может повлиять на их эксплуатационные качества. Не использовать петрифильмы, на которых присутствует коричневое окрашивание. Срок годности и номер партии указаны на каждой упаковке петрифильмов. 

Как и все системы для тестирования микроорганизмов, петрифильмы после использования могут содержать жизнеспособные бактерии, что может представлять потенциальную опасность. Следуйте современным стандартам методам инактивации и утилизации биологического материала.

 

Инструкция по использованию

Подготовка образца
Для разбавления образца использовать 0,1% пептонную воду, забуференную петонную воду, физиологический раствор или дистиллированную воду. Не использовать буферные растворы, содержащие цитрат, бисульфит или тиосульфат, т.к. эти соединения могут ингибировать рост бактерий. Смешать и гомогенизировать образец. Для оптимального роста бактерий довести рН разведенного образца до 6–8. Для коррекции рН кислых образцов используйте 1 н. NaOH. pH щелочных образцов довести с помощью 1 н. HCl. 

Внесение образца
1. Поместить петрифильм Staph Express Count Plate на ровную поверхность.
2. Поднять верхнюю пленку и внести 1 мл образца (или его разведения) в центр подложки.
3. Опустить верхнюю пленку на образец, избегать захват пузырьков воздуха.
4. Сразу же поместить пластиковый распределитель в центр петрифильма. Мягко надавить на центр, чтобы образец распределился равномерно. Не перемещать распределитель по пленке!
5. Убрать распределитель и оставить петрифильм на одну минуту для затвердевания геля. 

Инкубация
Инкубировать петрифильмы в горизонтальном положении прозрачной стороной вверх. Петрифильмы можно группировать в количестве не более 20. Инкубировать петрифильмы в течение (24±2) часов при (37±1)°C. 

Интерпретация
1. Количество колоний на петрифильмах Staph Express Count Plate можно учесть с помощью стандартного счетчика колоний или другого подсвечиваемого увеличителя.

  1. Оценка цвета колоний
    а) Если колоний нет или присутствуют только красно-фиолетовые колонии через (24±2) часа инкубации, то следует учесть все красно-фиолетовые колонии как S.aureus; тест завершен, диск Staph Express Disk не используется.
    b) Если присутствуют колонии иного цвета, чем красно-фиолетовый, то следует использовать для подсчета S.aureusдиск Staph Express Disk. 

Внимание! Высокий уровень фосфатазы, фермента, который  обычно содержится в некоторых пищевых продуктах, например, в сырых молочных продуктах, может окрасить всю среду в розовый цвет и маскировать красно-фиолетовые колонии. В этом случае следует использовать разведения образца.

3) Достать индивидуально запакованный диск Staph Express Disk из коробки, придерживая диск за выступ.

4) Приподнять верхнюю пленку петрифильма и поместить диск на поверхность. Выступ диска остается снаружи петрифильма.

Внимание! Иногда гель может разделиться при поднятии верхней пленки. Разделение геля не влияет на результат, поскольку диск активен с обеих сторон.

5) Опустить верхнюю пленку.

6) Прижать верхнюю пленку аккуратно по всей поверхности диска, включая края, для обеспечения одинакового контакта диска с гелем и удаления всех пузырьков воздуха.
- Если применено слишком большое давление гель может оказаться поврежденным, и зоны не будут отчетливыми.
- Если применено недостаточное давление, то гель может высохнуть, и зоны могут не образоваться.

7) Поместите петрифильмы с дисками в термостат, Петрифильмы можно группировать не более 20 штук. Инкубировать при (37±1)°C в течение от 60 минут до 3 часов. Проверять петрифильмы периодически. Окончательный результат по ДНК-азной реакции не позднее, чем через 3 часа.

8) Вынуть Петрифильмы из термостата. 

9) Учесть все розовые зоны, представляющие или нет колонии. Розовые зоны связаны с ростом S.aureus, или Staphylococcus hyicus и  Staphylococcus intermedius. Колонии без розовой зоны не являются S.aureus, и не должны учитываться. В случае, если весь диск розового цвета без четко выраженных зон, то присутствует большое количество S.aureus. Результат следует учесть как - количество колоний «слишком велико для подсчета» и следует развести образец, чтобы получить более точный результат.

10) При необходимости колонии можно изолировать для дальнейшей идентификации. Для этого следует поднять верхнюю пленку и извлечь колонию из геля. Если диск закрывает гель, то следует удалить диск и извлечь колонию из геля. Утилизация диска и стерилизация пинцета осуществляется стандартными методами. 

11) Если нет возможности провести подсчет в течение 3-х часов после окончания инкубации, то петрифильмы можно хранить в морозильнике в течение одной недели при температуре -15C°.