Бульон лаурил - сульфатный (Lauryl Sulfate Broth (Lauryl Tryptose Broth – LTB)

Среда для подсчета колиформ в воде и молочных продуктах

Формула в граммах на литр

Триптоза 20,0 Лактоза 5,0

Хлорид натрия 5,0 К₂HPO₄ 2,75

КН₂РО₄ 2,75 Лаурилсульфат натрия 0,1

Конечная величина pH 6,8 ± 0,2 при 25°C

Приготовление

Развести 35,6 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и на­греть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного раст­ворения. Разлить в пробирки с газособирающими колпачками для обнаружения газа. Стерилизовать 15 мин при 121°C. Готовая среда имеет светло-янтарную окраску и должна храниться при 2–8°C.

Примечание. Охлажденный бульон мутнеет, но становится прозрачным при комнатной или инкубаци-
онной температуре. Прозрачность для работы со средой не требуется, поскольку значе­
ние имеет только газообразование.

Использование

Бульон лаурил-сульфатный – это селективная среда, которая используется для подсчета колиформ в воде и молочных продуктах, а также для тестов, подтверждающих ферментацию лактозы колиформами с образова­нием газа. Еще одно преимущество данной среды – в возможности проведения теста на индол непосредственно в пробирке.

APHA рекомендует использовать данную среду для предварительного определения наиболее вероятного числа (MPN) колиформ в сточных водах, для подтверждения ферментации лактозы с образованием газа в молочных пробах и обнаружения колиформ в пище. Этот бульон был разработан для стимулирования хорошего роста колиформ с высоким уровнем газообразования из небольшого количества посевного материала.

Группа колиформ представляет собой как аэробные, так и анаэробные грамотрицательные палочки, не образующие спор, которые ферментируют лактозу с образованием кислоты и газа при инкубации при 35°C до 48 часов. Триптоза в 2% концентрации улучшает раннюю фазу роста колиформ, что является преимуществом по сравнению с казеиновым пептоном. Забуференный бульон обеспечивает медленную ферментацию лактозы и усиленное газообразование за более короткое время.

Триптоза является источником питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Лактоза – ферментируемый углевод, источник углерода и энергии. Фосфат калия – буферный агент, хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Лаурил­сульфат натрия – селективный агент, применяемый для ингибирования микроорганизмов, кроме колиформ. Спорообразующие аэробные бактерии полностью ингибируются.

Инокулировать образец и инкубировать при 35±2°C в течение 24−48 часов. После 24 часов инкубации измерить уровень образования газа в газособирающих колпачках. При отсутствии газообразования и не поступлении газа в перевернутые колпачки, инкубировать далее и наблюдать результаты спустя 48 часов.

Микробиологический тест

Следующие результаты были получены при использовании данной среды для роста типовых культур после инкубации при температуре 35±2°C и наблюдались через 24−48 часов.