Бульон Раппапорта соевый (Rappaport Soy Broth (Vassiliadis)

Среда для селективного выделения сальмонелл из пищевых продуктов, фекалий и воды

Формула в граммах на литр

Хлорид магния безводный 13,58 Хлорид натрия 7,2

Соевый пептон 4,5 KH₂PO₄ 1,26

K₂HPO₄ 0,18 Малахитовый зеленый 0,036

Конечная величина pH 5,2 ± 0,2 при 25°C

Приготовление

Развести 26,75 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Нагреть при частом помеши­вании до полного растворения. Разлить в емкости и стерилизовать 15 минут при 115°C. НЕ ПЕРЕГРЕВАТЬ! Готовая среда должна быть синего цвета и храниться при 2–8°C.

Использование

Бульон Раппапорта соевый рекомендован, после предварительного обогащения, для селективного выде­ления сальмонелл из пищевых продуктов, проб окружающей среды и фекалия. Среда Раппапорта была модифицирована Вассилиадисом (Vassiliadis) путем уменьшения концентрации малахитового зеленого и увеличения температуры инкубации, что дало лучшую стабильность pH готовой среды и оптимальную кон­центрацию хлорида магния, результатом чего является улучшенное восстановление сальмонелл.

Соевый пептон является источником питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов и аминокислот. Фосфаты калия поддерживают низкое значение pH среды, что в сочетании с хлоридом магния повышает осмотическое давление. Малахитовый зеленый ингибирует другие микроорга­низмы.

Процедура отбора проб пищевых продуктов:

– перенести 0,1 мл бульона для предварительного обогащения (25 г пробы в 225 мл Воды пептонной забуференной (кат. №1401), инкубированной 20 часов при 37°C) в 10 мл Бульона Раппапорта соевого (Васси­лиадиса);

– инкубировать 24 часа при 42±1°C;

– пересеять на селективные агаризованные среды, например, Агар гектоеновый для энтеробактерий (кат. № 1030), Агар Сальмонелла Шигелла (кат. № 1064) или Агар XLD (кат. № 1274) и инкубировать 18−24 часа при 35±2°C;

– проверить биохимические и серологические характеристики подозрительных колоний.

Микробиологический тест

Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 42±1°C и наблюдались через 24 часа.