Агар дезоксихолат-лактозный (Desoxycholate Lactose Agar)

Электронная почта
Слабоселективная среда для выделения и дифференциации
грамотрицательных кишечных бактерий
Описание

Кат. № 1025

Фасовка 500 г. Срок годности 4 года.
Хранить при температуре 20°С

Агар дезоксихолат-лактозный

Desoxycholate Lactose Agar

Слабоселективная среда для выделения и дифференциации
грамотрицательных кишечных бактерий

Формула в граммах на литр

Бактериологический пептон 10,0 Лактоза 10,0

Хлорид натрия 5,0 Цитрат натрия 2,0

Дезоксихолат натрия 0,5 Нейтральный красный 0,03

Бактериологический агар 15,0

Конечная величина pH 7,1±0,2 при 25°C

Приготовление

Развести 42,5 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и на­греть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного раст­ворения. НЕ ПЕРЕГРЕВАТЬ! НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ! Охладить до 45–50°C и разлить в чашки Петри. Перегревание может повысить степень ингибирования. Готовая среда должна быть красно-оранжевой и храниться при 8–15°C. В готовых чашках может присутствовать небольшой осадок.

Использование

Агар дезоксихолат-лактозный используется для выделения и подсчета колиформ в воде, молоке и других пищевых продуктах.

Грамположительные организмы ингибируются цитратом натрия и дезоксихолатом натрия. Пептон – источник питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Лактоза – ферментируемый углевод, источник углерода и энергии. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Нейтральный красный – индикатор pH. В основном, среда используется для подсчета колоний методом разведения. Это осуществляется путем помещения 1 мл нужного разведения в пустую чашку Петри, с последующим добавлением охлажденной до 45−50°C среды. Если продукт не был разведен (например, пастеризованное молоко), его можно добавлять непосредственно к расплавленной среде и разливать в чашки. После первоначального затвердения удобно нанести второй слой среды в чашку. Инкуби­ровать 18–24 часа при 35±2°C.

Колонии колиформ – чечевицеобразные (двояковыпуклые), розовые или ярко-красные. Дифференциация проводится на основании ферментации лактозы: лактозоферментирующие организмы в присутствии нейтраль­ного красного образуют красные колонии, а неферментирующие организмы дают бесцветные колонии (Salmo­nella и Shigella).

Если второй слой не накладывается, то колонии E. coli на поверхности агара – крупные и розовые, а коло­нии Enterobacter aerogenes – бледные, с розовым центром.

Микробиологический тест

Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при 35±2°C и наблюдались через 18–24 часа.

Микроорганизмы

Рост

Цвет колоний

Образование осадка

Escherichia coli ATCC 25922

Хороший

Красный

+

Klebsiella pneumoniae ATCC 13883

Хороший

Красный

+

Enterobacter cloacae ATCC 13047

Хороший

Розовый

±

Salmonella typhimurium ATCC 14028*

Хороший

Бесцветный

Shigella flexneri ATCC 12022

Хороший

Бесцветный

Enterococcus faecalis ATCC 11700

Ингибируется

Staphylococcus aureus ATCC 12923

Ингибируется

*По рекомендациям Европейской Фармакопеи инкубировать при 35–37°С 18–72 часа.