Агар Левина с метиленовым синим и эозином (Levine Agar (EMB)

Электронная почта
Среда для выделения и дифференциации энтеробактерий из клинических образцов
Описание

Кат. № 1050

Фасовка 500 г. Срок годности 4 года.
Хранить при температуре 20°С

Агар Левина с метиленовым
синим и эозином

Levine Agar (EMB)

Среда для выделения и дифференциации энтеробактерий из клинических образцов

Формула в граммах на литр

Желатиновый пептон 10,0 Лактоза 10,0

K2HPO4 2,0 Эозин 0,4

Метиленовый синий 0,065 Бактериологический агар 15,0

Конечная величина pH 7,1±0,2 при 25°C

Приготовление

Растворить 37,5 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и нагреть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного растворения. Стерилизовать 15 минут при 121°C. Охладить до 45–50°C, тщательно пере­мешать и разлить в чашки Петри. Готовая среда должна быть фиолетово-синей и храниться при 8–15°C.

Использование

Агар Левина с метиленовым синим и эозином – слабо-селективная среда для исследования и дифферен­циации энтеробактерий, ферментирующих и неферментирующих лактозу, из молочных и других пищевых продуктов и клинических образцов. Она также используется для анализа материалов с повышенными сани­тарно-гигиеническими требованиями на наличие колиформ.

Желатиновый пептон является источником питательных веществ, необходимых для роста микроорганиз­мов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Лактоза – ферментируемый углевод, источник угле­рода и энергии. Эозин и метиленовый синий – ингибиторы грамположительных бактерий. Колиформы, лактозо-ферментирующие организмы, идентифицируются как колонии сине-черного цвета. Колонии Salmonella spp. и Shigella spp., неферментирующих лактозу, – бесцветные, прозрачные или янтарные.

Среда также используется для выделения и идентификации Candida albicans. Инокулировать пробу и ин­кубировать 18–48 часов при 35±2°C, далее см. таблицу с морфологическими характеристиками колоний.

Исследуемый клинический материал (слюна, мокрота, выделения из дыхательных путей или вагинальные, соскобы с кожи и ногтей) засевается штрихом на поверхность агара с добавлением тетрациклина. Через 24–48 часов инкубации при 35°C в атмосфере, содержащей приблизительно 10% CO2, появляются колонии Candida albicans − на вид перистые или похожие на "паутину". Так как метод не всегда дает одинаковые результаты, одновременно следует проводить проверку на образование хламидоспор на специальных средах, таких как Агар BIGGY (кат. № 1006), а также выполнять экспресс-тесты на ферментацию сахаров.

Характеристики колоний

Escherichia coli. 2–3 мм в диаметре. Сине-черные в центре, с прозрачными на свет краями, в отраженном свете часто имеют металлический зеленый блеск.

Enterobacter aerogenes. Крупные, 4–6 мм в диаметре. Приподнятые, слизистые. На свет серовато-корич­невые в центре. Обычно не имеют металлического блеска.

Salmonella spp. и Shigella spp. Прозрачные, янтарного цвета или бесцветные.

Proteus spp. В отсутствие обильного роста похожи на Salmonella spp. или Shigella spp.

Staphylococcus spp. (коагулазо-положительный): точкообразные, бесцветные.

Candida albicans. Через 24–48 часов при 35°C в 10% CO2. Перистые или в виде паутины.

Другие виды Candida. Плоские, округлые, дрожжеподобные колонии. Время от времени можно выделить Nocardia.

Микробиологический тест

Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 35±2°C и наблюдались через 24–48 часов.

Микроорганизмы

Рост

Цвет колонии

Enterobacter aerogenes ATCC 13048

Хороший

Розовый

Proteus mirabilis ATCC 14273

Хороший

Бесцветный

Salmonella typhimurium ATCC 14028

Хороший

Бесцветный

Escherichia coli ATCC 25922

Хороший

Сине-черный с зеленым металлическим блеском
и черным центром

Staphylococcus aureus ATCC 25923

Ингибируется